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選用凈信組織研磨儀研磨小鼠皮膚組織高效提取RNA
時(shí)間: 2020-08-08 瀏覽次數(shù):245

  在制作小鼠皮膚組織樣品的時(shí)候,會(huì)發(fā)現(xiàn)皮膚組織韌性特別高。皮膚富含纖維組織和彈性,要從這類組織有效提取RNA是非常困難的,因此完全研磨這些組織是十分具有挑戰(zhàn)性的。傳統(tǒng)的人工或用手持式勻漿器來研磨不僅費(fèi)時(shí),研磨后的效果也不盡人意比較差,RNA產(chǎn)量低且令樣本發(fā)熱,那么使用組織研磨儀會(huì)有什么不同的效果呢?

  

  大、小鼠皮膚組織提取DNA、RNA是目前各高校實(shí)驗(yàn)室的一項(xiàng)難題。溫州醫(yī)科大經(jīng)過多個(gè)品牌試用比較,最終選擇上海凈信研磨儀來處理小鼠皮膚組織。本次實(shí)驗(yàn)對(duì)象為小鼠去毛后處理過的皮膚,要求磨細(xì)一點(diǎn),提高RNA的濃度,涉及到RNA提取還需要低溫研磨,因?yàn)橛刑崛∫?,所以溫度不能太低,否則凍住液體無法研磨,
  
  實(shí)驗(yàn)步驟:

  1、準(zhǔn)備金屬適配器一套,離心管和研磨珠若干。
  2、預(yù)冷模塊,把金屬適配器放到液氮或冰箱中預(yù)冷(不用的時(shí)候順手把模塊放入-20冰箱,即可省去預(yù)冷步驟)
  3、取適量小鼠皮膚組織、研磨珠、提取液一起放入離心管中,每管加三到五顆研磨珠,蓋子蓋上。
  4、將完成預(yù)冷后的金屬模塊取出,放入研磨儀中固定(適配器底部與軸的卡槽互相卡牢)放平后將離心管分別放入適配器對(duì)應(yīng)孔位,(注意平面配平,對(duì)稱放樣)蓋上適配器蓋,旋緊螺帽。
  5、設(shè)置好參數(shù)(根據(jù)組織類型以及量微調(diào)),開始研磨。
  6、磨好后打開儀器取出離心管,即可進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

  

 (皮膚組織裝管圖)                                                              (研磨效果圖)

  
  上圖為2-3分鐘的研磨效果,已經(jīng)完全研磨完成。之前所有樣品都是人工處理,小鼠皮膚樣特別難磨,磨出來效果很差,RNA提不出來,所以選用凈信組織研磨儀代替人工處理。效率高,效果好,完美解決了老師的問題。
  
  注意事項(xiàng):
  1、按照組織的種類和量來選擇研磨珠能達(dá)到最好的效果,有不清楚的及時(shí)問上海凈信銷售人員。
  2、往金屬適配器里放離心管時(shí)注意平面配平,保證適配器壓蓋在水平線上。

  

  上圖為實(shí)驗(yàn)選用儀器: 全自動(dòng)樣品快速研磨儀 JXFSTPRP-24

  
  JXFSTPRP®系統(tǒng)與目前已有的其它樣品制備方法相比,具有通用性廣、高效靈活的優(yōu)點(diǎn)。該系統(tǒng)避免了研磨、勻漿、超聲波處理等傳統(tǒng)方法的費(fèi)力、耗時(shí)、低效等諸多缺點(diǎn),可以高效、快速、穩(wěn)定地裂解并純化各種類型樣品的核酸與蛋白。

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